中共用国家基金资助顶级科学家制造跨种间传播,高传染性、高致病性的新型病毒

—— 中科院微生物研究所高福2011年申请中国国家基金的资金申请书三年研究内容原文陈列

OCR文件整理: GBW | 校对: 文明世界(WMSky)

前言:文明世界(WMSky)| 校对: GBW

前言

路德社2021年2月20日晚间节目告诉观众,有人挖出了中共国科学院首席科学家、现中共国疾控中心主任高福在2011年向中共国国家基金提出的资金申请书。从节目中显示的文件标题来看,该研究课题是一项为期5年的重大研究课题,专门研究所谓 “重要病毒 “跨种间感染和传播致病机制。

路德在节目中向观众展示了申请书的其中三页,即头三年的研究内容和预计目标(见下图)。内容一开始就提到在全国各地大量采集病毒样本,从不同地区、不同动物、包括野生动物、动物园动物和特种养殖动物中采集,包括蝙蝠、啮齿类动物、食虫目动物,鸡、猪和犬等家畜和家禽。其中500份是蝙蝠样本,500份家畜样本,共计高达一千份! 涉及到的病毒有流感病毒、新型冠状病毒、汉坦病毒、乙型脑炎病毒、登革病毒、狂犬病毒和西尼罗河病毒等。研究目标是运用现代生物技术手段,来获得具有高传染性、高致病性特别是具有嗜神经性(能够感染神经细胞)的新型病毒

路德节目展示的三页文件

“内容非常可怕!”路德惊叹。”这与中共军方教科书对‘现代基因武器’这个新概念的描述和与闫丽梦博士在这个节目里告诉大家的超限生物武器概念是一致的。”

路德提到的这本名为《非典非自然起源和人制人新种病毒基因武器》的军事教科书,由中共国军事医学科学出版社于2015年出版。它的英文版正在由爆料革命战友全球联合翻译中,即将面世。

人们不禁要问,他们为什么要这么做? 这是为了什么?显然,这项研究并没有对SARS-CoV-2起到预防作用。好奇地想知道,它的研究成果在当下我们身处其中的世纪大瘟疫中扮演了什么角色?

信息来源: 路德社Lude Media  2021年2月20日晚间节目https://www.youtube.com/watch?v=-HucSkjWxjs&t=3190s

原文(经ORC整理)

 项目名称:重要病毒跨种间感染与传播致病的分子机制研究 
 首席科学家:高福中国科学院微生物研究所 
 起止年限:2011.1至2015. 8 
 依托部门:中国科学院 
 研究内容预期目标
第一年
1. 在全国各地大量采集蝙蝠、啮齿类动物、 食虫目动物的血清、咽拭子和肛拭子样品;采集不同地区、不同动物、包括野生动物、动物园动物和特种养殖经济动物、以及包括鸡、猪和犬等家畜和家禽的棉拭子、组织和血液样品。

2. 进行流感病毒、新型冠状病毒、乙脑病毒等的分离和病毒流行病学调查研究,研究病毒的宿主特征,对分离鉴定的病毒进行全基因组测定与分析;观察新型病毒的生物学特征,重点是对动物的致病性和传播性流感病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;

3. 利用原核或真核细胞表达乙型脑炎病毒、登革病毒、流感病毒囊膜蛋白;利用分子筛层析、离子交换等技术分离纯化蛋白;病毒囊膜蛋白的晶体筛选;建立自噬途径研究细胞模型。

4. 冠状病毒在不同宿主中的复制及跨属传播机制;登革病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;病毒在不同组织中复制的miRNA表达谱对病毒复制的调控及分子机制;

5. 以成熟的病毒蛋白与宿主因子互作平台为其础,寻找流感病毒的宿主限制性因子;筛选与汉坦病毒主蛋白(核蛋白为主)相互作用的宿主细胞因子;通过蛋白质互作手段,找出种间毒株差异的宿主相关蛋白,并获得不同毒力狂犬病毒株感染的潜伏期早期和感染中、晚期免疫相关细胞和中枢神经组织材科。

6. 人MHC转基因小鼠构建;高致病性禽流感病毒、西尼罗病毒等新型病毒嗜神经生物学特征鉴定。  
1. 采集蝙蝠样本500份;家畜样本 500份。

2. 获得流感病毒、新型冠状病毒、乙脑病毒等的分离毒株和序列;获得分离毒株的致病性和传播性特点。

3. 获得不同基因型的乙型脑炎病毒、 登革病毒、流感病毒囊膜蛋白;获得部分囊膜蛋白的晶体结构。

4. 对病毒目的基因进行定点突变,观察病毒突变株和野生株对不同宿主细胞及不同组织来源细胞中复制能力的差别,寻找决定病毒在不同种属宿主细胞中复制的关键位点。

5. 筛选出5-10种分别与流感病毒、 汉坦病毒及狂犬病病毒蛋白相互作用的宿主细胞因子。

6. 获得人HLA-A2/DR1和 HLA-Al11/DR1转基因小鼠。完成 5-10株高致病性禽流感病毒、狂犬病毒等新型病毒的生物学特征鉴定,获得至少4株具有不同神经嗜性新型病毒。

7. 发表研究论文10篇以上。
第二年

1. 检测新型冠状病毒、新型汉坦病毒、 新型副粘病毒新型流感病毒在动物中的感染情况;对病毒检测为阳性样品进行病毒培养和分离;分析新检测的病毒序列与已知人类同类病毒的差异和进化关系。

2. 继续进行病毒的分离和调查;研究病毒在经过不同宿主传播后病毒生物学特性的改变特征和规律;对分离鉴定 的病毒进行全基因组测定,利用基因组信息学分析技术,研究病毒的遗传变异和分子进化规律和特征,并建立病毒的反向遗传操作技术系统。

3. 分离病毒易感细胞膜蛋白,利用GST pull-down的方式筛选候选受体;质谱鉴定候选受体;研究不同流感病毒 HA 蛋白与受体的作用特征;在细胞模型上研究自噬影响流感病毒侵入的分子机制。

4. 流感病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;冠状病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;登革病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;病毒在不同组织中复制的miRNA 表达谱对病毒复制的调控及分子机制。

5. 运用蛋白-蛋白互作以及病毒学方法探索宿主限制性因子在流感病毒复制过程中的调控机制;追踪宿主限制性 因子与病毒核蛋白相互作用后对病毒复制、装配及成熟释放的影晌和生物学意义;通过色谱质谱技术对外周免疫相关细胞和中枢神经组织进行蛋白质组学分析,发现狂犬病病毒感染前后宿主在蛋白质组水平表现出的差异点。

6. 建立病毒体内分布实时监测动物模型,对高致病性禽流感病毒等病毒的感染动力学进行初步探讨。
1. 获得10株以上病毒的部分基因组序列;确定新型病毒与人类病毒在血清学和基因序列上的差异。

2. 获得流感病毒、新型冠状病毒、乙脑病毒等的分离毒株和全基因组序列;获得流行毒株的遗传变异规律和生物学特性;建立病毒的反向遗传操作系1套。

3. 获得乙脑病毒、登革病毒细胞候选受体;获得一些影响流感病毒HA蛋白与唾液酸受体的重要蛋白残基;初步了解流感病毒如何影响细胞自噬的信号通路。

4. 获得目的重组病毒;建立人冠状病毒库揭示不同突变对病毒RNA翻译和复制的影响;获得宿主细胞miRNA 与病毒miRNA表达谱。

5. 筛选出2-6种分别与流感病毒和汉坦病毒相互作用的宿主限制性因子;阐明部分宿主限制性因子对流感病毒和汉坦病毒复制的影晌及其作用机制; 获得狂犬病病毒感染前后宿主在蛋白质水平的差异点。

6. 明确高致病性禽流感病毒对在 HLA-A2/DR1、HLA-A11/DR1转基因小鼠体内感染特性,初步揭示MHC限制性在高致病性禽流感病毒跨物种感染过程中的作用;完成新型病毒的基因组测序,利用生物信息学方法并发现嗜神经性相关毒力位点,通过反向遗传学手段进行验证。

7. 发表研究论文20篇以上。
第三年

1. 对检测为阳病毒性的进行病毒分离培养;开展新分类病毒的细胞和动物敏感性实验,评价病毒的宿主范围和对 实验动物的致病能力。

2. 继续进行病毒分子流行。

3. 病学的调查与研究,分析病毒的进化和变异规律; 利用构建的反向遗传操作技术平台,研究病毒基因点变异、基因突变、基因重配等对病毒致病性和传播性的影响,重点探讨影响病毒传播特性,尤其是跨种间传播特性的关键因子或因素。

4. 在细胞模型上对筛选的乙脑病毒、登革病毒候选受体进行进一步的验证;流感病毒突变体的表达纯化、与唾液酸受体复合体的晶体结构;在细胞模型上研究自噬影响流感病毒侵入的分子机制。

5. 流感病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;冠状病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;登革病毒在不同宿主中的复制及跨种属传播机制;病毒在不同组织中复制的miRNA 表达谱对病毒复制的调控及分子机制。

6. 继续探索宿主限制性因子在流感病毒及汉坦病毒复制过程中的调控机制; 探索弱毒诱导的早期抗感染因子(宿主限制性因子)的本质和强毒诱导的早期致病因子对宿主限制性因子的影响。

7. 病毒体内分布实时监测动物模型构建;新型病毒嗜神经性相关毒力位点的功能研究。
1. 获得3-5株新分离病毒的全基因组序列;揭示野生动物或家畜冠状病毒的遗传变异情况。

2. 建立病毒的毒株库和基因库;确定影响病毒致病性和传播性的关键基因位点。

3. 获得1-2个乙脑病毒、登革病毒受体或辅助受体;从分子结构水平揭示流感病毒HA蛋白与唾液酸受体相互作用影响流感病毒跨种间传播的机制;闸明流感病毒表达蛋白如何影响细胞自噬水平。

4. 揭示病毒在不同宿主上生长能力的动态变化;获得人冠状病毒感染性克隆;获得四种病毒RNA上的细胞蛋白因子。

5. 深入阐明宿主限制性因子在流感病毒及汉坦病毒复制 过程中的调控机制:筛选出1-2个与狂犬病病毒相互作用的宿主限制性因子。

6. 通过转基因技术获得流感病毒体内分布实时监测动物模型;通过细胞学和动物学实验,初步阐明新型病毒嗜神经性相关毒力位点的作用机制。

7. 发表研究论文20篇以上。

信息来源:路德社 2021年2月20日晚间节目https://www.youtube.com/watch?v=-HucSkjWxjs&t=3190s

校对:宁静致远

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Basil4

2月 27日